一、範圍

　　本方法規定了動物源細菌（大腸杆菌、沙門氏菌、腸球菌、金黃色葡萄球菌、副豬嗜血杆菌、魏氏梭菌和偽結核棒狀杆菌）藥敏檢測試劑盒的操作方法。

　　二、材料

　　除微生物實驗室常規滅菌設備外，其他設備和材料如下：

　　2.1 恒溫培養箱35±2℃

　　2.2 生物安全櫃

　　2.3 濁度計或者標準比濁管

　　2.3 微量加樣器1uL~1000uL

　　2.4 吸頭（與微量加樣器匹配）

　　三、操作步驟

　　取出試劑盒，打開包裝待用。

　　菌液製備

　　將無菌棉簽用生理鹽水潤濕後，直接取過夜培養皿上數個新鮮菌落，與適量無菌生理鹽水混勻。然後，用標準比濁管或者濁度計校正菌液濃度至0.5麥氏單位（1~2×108CFU/mL）。用試劑盒中的肉湯按照使用說明書要求的倍數稀釋，混勻備用。

　　菌液接種

　　除空白對照外，其餘的95孔加入製備好（用前要混勻）的菌液100?L

　　空白對照孔中加入100?L無菌肉湯。蓋好板蓋並記錄菌號。

　　孵育

　　將檢測板置於35℃±2℃很穩培養箱中孵育16~18小時。

　　觀察結果

　　在襯有黑底板的光線下，用肉眼觀察。

　　先觀察陰性對照孔和陽性對照孔：陰性對照孔應無細菌生長，孔內液體未見渾濁；陽性對照孔內應有細菌生長所形成的圓形或者網狀沉澱。

　　如果陰性和陽性對照結果正常，繼續觀察其餘孔內細菌生長情況，在無細菌生長的孔內所含低抗菌藥物濃度即為低抑菌濃度（MIC）。

　　四、結果記錄

　　將MIC結果記錄在敏感性檢測結果統計表中。

　　敏感性檢測結果統計表

　　（1）G-菌（大腸杆菌、沙門氏菌和副豬嗜血杆菌）MIC

　　注：直接填寫檢測的MIC數值。

　　（2）G+菌（腸球菌、金黃色葡萄球菌和偽結核棒狀杆菌）MIC

　　注：直接填寫檢測的MIC數值。

　　（3）彎曲杆菌MIC

　　注：直接填寫檢測的MIC數值。

　　（4）腸球菌和魏氏梭菌MIC（促生長抗菌藥物監測）

　　注：直接填寫檢測的MIC數值。